無菌室的要求
1．工作室應矮小、平整，麵積隻需4米2左右，高2.2―2.3米（mǐ），內部裝修應平整、光滑，無凹凸不平或棱角（jiǎo）等，四壁及屋頂（dǐng）應用不（bú）透水之材質，便（biàn）於擦洗及殺（shā）菌
2．室內采光麵積大，從室外應能看（kàn）到室內情況。
3．為保證（zhèng）無菌室的潔淨，無菌室周圍需設緩衝走廊，走廊（láng）旁再（zài）設（shè）緩衝間，其麵積可（kě）小於無菌室。
4．無菌室（shì）、緩衝走廊及緩衝間均設有日（rì）光燈及供消毒空氣用紫外燈，殺菌紫外燈離工作台以（yǐ）1米為宜 ，其電源開關均應設在室外。
5．無菌室與緩衝間（jiān）進出口應設（shè）拉門，門與窗平齊，門縫要封緊（jǐn），兩（liǎng）門應錯開，以免空氣對流造成汙（wū）染。
6．無菌室的（de）使用與管理
（1） 無菌室應保持清潔（jié）整齊，室（shì）內僅存（cún）放必（bì）須的檢（jiǎn）驗用具如酒精（jīng）燈、酒精棉、火柴、鑷子、接種針、接種環、玻（bō）璃鉛筆等。&不要（yào）放與檢測無關的物（wù）品
（2） 室內（nèi）檢（jiǎn）驗用具及凳桌等保持固定位置，不隨（suí）便移動。
（3） 每2―3周用2%石炭（tàn）酸水溶液擦（cā）拭（shì）工作台、門、窗、桌、椅及地（dì）麵，然後用3%石炭酸水溶液噴霧消毒空氣，最後紫外（wài）燈殺菌半小時（shí）
（4） 定期檢查室（shì）內空氣無菌狀況，細菌數應控製在10個以下，發現不符合要求時，應立即徹底消（xiāo）毒滅菌。/無菌室無菌程度的測定方法：取普通肉湯瓊脂平板、改良馬丁培養基平板各3個（平板直徑均9厘米），置無菌室各工作位置上（shàng），開蓋（gài）曝露半小時，然（rán）後倒置進行培養，測細菌總數應置37℃溫箱培養48小時；測黴菌數則（zé）應置27℃溫（wēn）箱培養5天。細菌`黴菌總數均不得超過10個為 。
（5） 無菌室殺菌前，應（yīng）將（jiāng）所有物品置於操作之部位（待檢物例外），然後打開紫外燈（dēng）殺（shā）菌30分鍾，時間一到，關（guān）閉紫外燈待用
（6） 進入無菌室前，必（bì）須於緩衝間更換消（xiāo）毒過的工作服、工作帽及工作鞋。
（7） 操作應嚴格按照無菌操作規定進（jìn）行，操作中（zhōng）少說話，不喧嘩，以保持環境（jìng）的無菌狀態。
器材及場所的滅菌消毒
微生物檢驗用器材及場（chǎng）所必須進行（háng）滅菌或（huò）消毒處理，不同的對象采用不同的處理方法
1． 高（gāo）壓蒸汽滅菌: 工作服、口罩、稀釋液等，置（zhì）高（gāo）壓殺菌（jun1）鍋內，一般采用121℃滅菌半小時（shí）,當然不同的（de）培養基有不同的要求,應（yīng）分別處理
2． 火焰滅菌： 接種針、接種環等可直接火焰滅菌
3． 高（gāo）溫幹燥滅菌： 各種玻璃器皿、注射（shè）器、吸（xī）管等（děng），置於燥箱中160℃滅菌2小時
4． 一 般消毒: 無菌（jun1）室內的凳、工作台、試管架、天平、待檢物容器（qì）或包（bāo）裝均無法進行滅菌，必須用（yòng）其他方法（fǎ）進行消毒（dú）處理，采用2%石炭酸或來蘇兒水溶液擦拭消毒，工（gōng）作人員的手也用此法進行消毒
5． 空氣的（de）消毒： 開啟紫外燈照射30―60分鍾 即可。
操作要領
準備工作（zuò）
1． 先（xiān）進行無菌室空間的消毒，開啟紫外燈30―60分（fèn）鍾
2． 檢驗用的有關器材， 搬入無菌室前必須分別進會滅菌消毒
3． 操作人員必須將手清洗消毒，穿戴（dài）好（hǎo）無菌工作衣、帽和鞋，才能進入無菌室（shì）
4． 進入無菌室後再一次消毒手部，然後才進行（háng）檢驗操作（zuò）
操（cāo）作過程注意事項
1． 動作要（yào）輕，不能太快，以免攪動空氣增加汙染；玻璃器皿也應輕取輕放，以免破（pò）損汙染環境
2． 操作應在近火焰區（qū）進行。
3． 接（jiē）種（zhǒng）環、接（jiē）種針等金屬器材使用前後均需灼燒，灼（zhuó）燒時先通過內焰，使殘物烘幹後再灼燒滅菌
4． 使用吸管時，切勿用嘴直接吸（xī）、吹吸管，而（ér）必須（xū）用洗耳球操作。
5． 觀（guān）察平板（bǎn）時不好 開蓋，如（rú）欲沾取菌落檢查時，必需靠近火焰區操作，平皿蓋也不能 大開，而是上下蓋適當開縫。
6． 進行可疑致病菌塗片（piàn）染（rǎn）色時，應（yīng）使用夾子夾持玻片，切（qiē）勿用手 直接拿玻（bō）片，以免造（zào）成汙染，用過的玻片也應置於消毒液中浸泡消毒，然後再洗滌。
7． 工作結束，收拾好工（gōng）作台（tái）上的樣品及器（qì）材，最後用消毒液擦拭工作台。
